荧光定量pcr

本文目录一览：

• 1、荧光pcr扩增的原理和步骤?
• 2、rfu是什么实验?
• 3、什么是荧光定量PCR技术?

荧光pcr扩增的原理和步骤?

荧光定量PCR技术，是指在普通PCR技术的基础上，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。主要有两种方法： 1、SYBR Green 染料法 SYBR能够结合到双链DNA上面，当系统中的模板被扩增时，SYBR能够有用结合到新组成的双链上面，跟着PCR的进行，结合的SYBR燃料越来越多，被仪器检测到的荧光信号越来越强，然后到达定量的意图。在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。 2、TaqMan探针法： PCR扩增时在参加一对引物的一起参加一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两头分别标记一个陈述荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，陈述基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA恣意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使陈述荧光基团和淬灭荧光基团别离，然后荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，完成了荧光信号的累积与PCR产品形成彻底同步。

rfu是什么实验?

RFU是relative fluorescence units (相对荧光单位)的意思，在机械加工领域RFU值常被用于做表面残留污染物检测，在生物医学领域也会利用RFU值进行疾病诊断。 如果是用于做零件加工检测的使用SITA清洁度仪测试，如果是生物医学领域的可用PCR仪进行测试。

什么是荧光定量PCR技术?

实时检测PCR扩增，在扩增的指数期对起始模板进行定量，在扩增过程中，荧光信号随着PCR产物的增加而增强。我们实验室使用的BIOGHSC Super Probe Kit PCR实验检测DNA,测得的循环数在28左右，整个PCR过程有4个阶段，基线期---指数增长期---线性增长期---平台期，指数增长期内，PCR有高度重复性，一般的检测指标是看线性图谱的扩增曲线的起跳值（CT值）。